膠體金溶液具有很高的動(dòng)力學(xué)穩定性,在穩定因素不受破壞時(shí)自身凝聚極慢,可放置數年不發(fā)生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質(zhì)、溶膠濃度、溫度、非電解質(zhì)等。
金溶膠必須有少量電解質(zhì)作穩定劑,但濃度不宜過(guò)高。高濃度親水性非電解質(zhì)能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。
當金溶膠吸附蛋白質(zhì)后,溶膠的穩定性隨溶液pH而變化,而這種變化又取決于吸附蛋白質(zhì)的等電點(diǎn),如ConA,過(guò)氧化物酶等,當pH較低時(shí)保持穩定,提高pH則顯得不穩定,接近等電點(diǎn)或略高時(shí)又變得穩定了。
制備高質(zhì)量膠體金溶液的注意事項:
?。?)玻璃器皿必須*清洗,最好是經(jīng)過(guò)硅化處理的玻璃器皿,或用第一次配制的膠體金穩定的玻璃器皿,再用雙餾水沖洗后使用。否則影響生物大分子與金顆粒結合和活化后金顆粒的穩定性,不能獲得預期大小的金顆粒。
?。?)試劑、水質(zhì)和環(huán)境:劑配制必須保持嚴格的純凈,所有試劑都必須使用雙餾水或三餾水并去離子后配制,或者在臨用前將配好的試劑經(jīng)超濾或微孔濾膜(0.45µm)過(guò)濾,以除去其中的聚合物和其它可能混入的雜質(zhì)。
?。?)配制膠體金溶液的pH以中性(pH7.2)較好。
?。?)氯金酸的質(zhì)量要求上乘,雜質(zhì)少。最好是進(jìn)口的。
?。?)氯金酸配成1%水溶液在4℃可保持數月穩定,由于氯金酸易潮解,因此在配制時(shí),最好將整個(gè)小包裝一次性溶解。